Invitrogen轉染試劑核心產品線與技術原理
更新時間:2025-09-08
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在分子生物學、細胞生物學、基因治療和生物制藥等前沿科研領域,基因轉染技術是實現外源DNA、RNA或蛋白質導入真核細胞的核心手段。通過轉染,研究人員可以研究基因功能、調控蛋白表達、構建穩定細胞系或開發基因療法。在眾多轉染試劑品牌中,Invitrogen™憑借其性能、廣泛的細胞適用性和高度的可重復性,成為全球實驗室信賴的品牌。
一、什么是轉染?Invitrogen轉染試劑為何重要?
轉染是指將外源核酸(如質粒DNA、siRNA、mRNA、CRISPR/Cas9組件)導入哺乳動物細胞的過程。由于細胞膜具有天然屏障作用,裸露的核酸難以進入細胞,因此需要借助轉染試劑作為“分子載體”,幫助核酸穿越細胞膜并釋放到細胞質或細胞核中。
Invitrogen自20世紀90年代推出脂質體轉染試劑以來,持續創新,開發出適用于不同細胞類型、實驗目的和應用場景的全系列轉染產品。其試劑以高轉染效率、低細胞毒性、操作簡便著稱,廣泛應用于基礎研究、藥物篩選、疫苗開發和基因編輯等領域。
二、Invitrogen轉染試劑核心產品線與技術原理
Invitrogen的轉染試劑主要基于以下幾種技術平臺:
1.Lipofectamine™系列:脂質體轉染的黃金標準
-Lipofectamine™3000:適用于大多數貼壁和懸浮細胞,尤其對難轉染細胞(如原代細胞、干細胞)表現出色。它利用陽離子脂質與核酸形成脂質體復合物(lipoplexes),通過內吞作用進入細胞,并在內體中釋放核酸。配套的P3000™增強劑可進一步提升效率。
-Lipofectamine™2000:經典款,廣泛用于HEK293、HeLa等常用細胞系,轉染效率高,成本適中。
-Lipofectamine™RNAiMAX:專為小RNA(siRNA、miRNA)設計,實現高效的基因沉默(RNA干擾),廣泛用于功能基因組學研究。
-Lipofectamine™MessengerMAX:專為mRNA轉染優化,適用于瞬時蛋白表達、疫苗研發和基因編輯(如Cas9 mRNA遞送)。
2.Polyethylenimine(PEI)基試劑:高性價比的聚合物選擇
-PEI MAX™:一種線性陽離子聚合物,通過與DNA形成緊密復合物實現高效轉染。特別適用于大規模質粒生產和懸浮細胞轉染(如CHO、HEK293細胞),在生物制藥工業中用于瞬時表達重組蛋白。
-JetPEI®(Invitrogen授權品牌):性能穩定,適用于難轉染細胞。
3.其他專用試劑
-Fugene®HD(原Roche,現由Invitrogen分銷):低毒性,適用于敏感細胞。
-ScreenFect®系列:針對高通量篩選優化。
三、技術優勢與應用特點
1.高轉染效率
在優化條件下,可達80%以上的轉染率,確保實驗結果的顯著性和可重復性。
2.廣泛的細胞兼容性
覆蓋HEK293、HeLa、CHO、HepG2、神經元、原代細胞、干細胞等多種細胞類型。
3.低細胞毒性
經過優化的配方減少對細胞代謝的干擾,維持細胞活力,適合長期實驗。
4.操作簡便
多數試劑采用“混合-加入”一步法,無需更換培養基,適合高通量操作。
5.多功能性
支持DNA、siRNA、miRNA、mRNA、CRISPR核糖核蛋白(RNP)等多種核酸類型的遞送。
四、典型應用場景
1.基因功能研究
過表達或敲低特定基因,研究其在信號通路、細胞周期、凋亡中的作用。
2.蛋白質表達與純化
瞬時轉染表達重組蛋白,用于結構生物學或抗體生產。
3.RNA干擾(RNAi)
使用siRNA或shRNA實現靶基因沉默,篩選功能基因。
4.基因編輯
遞送CRISPR-Cas9質粒或RNP復合物,實現基因敲除、敲入或堿基編輯。
5.啟動子與調控元件分析
轉染報告基因載體(如luciferase),研究啟動子活性。
6.疫苗與基因治療研發
mRNA疫苗開發中,高效遞送編碼抗原的mRNA至細胞。
五、使用建議與優化策略
-細胞狀態:使用對數生長期、高活力(>90%)的細胞;
-核酸質量:使用高純度、無內毒素的質粒DNA;
-試劑與核酸比例:遵循說明書推薦比例,可進行梯度優化;
-血清影響:部分試劑(如Lipofectamine™2000)可在含血清培養基中轉染,提高細胞存活率;
-轉染后處理:根據實驗需求,在適當時間收集細胞或進行功能檢測。
六、結語
Invitrogen轉染試劑不僅是實驗室的常規耗材,更是推動生命科學研究進步的關鍵工具。其不斷創新的產品線,為科學家提供了高效、可靠、靈活的基因遞送解決方案。無論是在基礎科研的探索中,還是在生物醫藥的產業化進程中,Invitrogen都以其性能和全球技術支持體系,贏得了廣泛贊譽。掌握其使用技巧,優化轉染條件,將幫助研究人員更高效地實現基因操控,解鎖生命科學的無限可能。